抗原抗體反應—凝集反應(agglutination)指顆粒性抗原(細菌、細胞等)與相應的抗體,或可溶性抗原(亦可用抗體)吸附于與免疫無關的載體形成致敏顆粒(免疫微球)與相應的抗體(或抗原),在有適量電解質存在下,形成肉眼可見的凝集小塊。
1.直接凝集反應(direct agglutination)是顆粒性抗原又稱凝集原與相應抗體直接結合所呈現的凝集現象,如紅細胞和細菌凝集試驗。主要有玻片法、試管法及微量凝集法。玻片法為定性試驗,方法簡便快速,常用已知抗體檢測未知抗原,應用于菌種鑒定,分型及人紅細胞ABO血型測定等;試管法通常為半定量試驗,常用已知抗原檢測待檢血清中有無相應抗體及其相對含量,以幫助臨床診斷和分析病情。例如臨床實驗室常用的診斷傷寒或副傷寒的肥達氏試驗(Widal test);診斷布魯氏菌病的瑞特氏實驗(Wrig test)及診斷斑疹傷寒及恙蟲病的外裴二氏試驗(Weil felix test)等。
2.間接凝集反應(indirect passive agglutination)是可溶性抗原或抗體吸附于與免疫無關的微球載體上,形成致敏載體(免疫微球),與相應的抗體或抗原在電解質存在的條件下進行反應,產生凝集,稱為間接凝集或被動凝集;實驗室常用的載體微球有人O型血紅細胞、綿羊或家兔紅細胞、聚苯乙烯乳膠、活性炭等,根據應用的載體種類不同,分別稱為間接血凝、間接乳膠凝集及間接炭凝試驗等。本試驗主要用于某些傳染病如鉤端螺旋體抗原和原發(fā)性肝癌的早期診斷。間接凝集反應擴大了凝集反應的應用范圍,其發(fā)展取決于載體,修飾載體使其帶有化學活性基團,或選用吸附力強、穩(wěn)定性高和帶有色素的載體,必將演化出新的方法。
3.間接凝集抑制試驗(indirect agglutination inhibition test)將可溶性抗原與相應抗體預先混合并充分作用后,再加入抗原致敏的載體,此時因抗體已被可溶性抗原結合,阻斷了抗體與致敏載體上的抗原結合,不再出現凝集現象,稱為間接凝集抑制試驗。臨床常用的免疫妊娠試驗(immune pregnancy test)即屬此類。若以紅細胞作為載體則稱為間接血凝抑制試驗。
所有上述凝集試驗均可劃分為正向和反向凝集試驗,以已知抗原測抗體的凝集試驗為正向凝集試驗,通?!罢?兩字省略,反之,為反向凝集試驗。
4.協(xié)同凝集試驗(co-agglutination)以金黃色葡pu萄球菌為載體,利用其細胞壁中的A蛋白(SPA)具有結合人及多種哺乳動物IgG Fc段的特性。將特異性抗體結合至金黃色葡pu萄球菌菌體,其Fab段暴露于菌體表面,遇到相應抗原時與之結合,即可導致金黃色葡pu萄球菌凝集。稱為協(xié)同凝集試驗。常用于早期診斷流腦、傷寒、菌痢及布魯氏菌病。
5.抗人球蛋白試驗(anti-human globulin reaction)機體受抗原刺激后,除可產生完wan全抗體外,在某些病人(先天性溶血性貧血)也可產生不完wan全抗體(IgG),后者雖能與抗原結合,但不出現肉眼可見反應現象。Coomb等把含有不完wan全抗體血清球蛋白注射到異種動物體內,使其產生抗人球蛋白抗體,將該抗人球蛋白抗體加入到顆粒性抗原與相應的不wan全抗體復合物中,就能出現肉眼可見的凝集現象,稱為抗人球蛋白試驗,又稱Coomb's試驗。主要用于檢測Rh抗體及布魯氏菌抗體。